Lipo3000細胞轉染試劑轉染效率高，細胞毒性小，適合各種核酸分子或蛋白質的轉染實驗。細胞轉染是外源基因進入真核細胞的一種重要方法。這些外源DNA或RNA通過轉染試劑的包裝輔助才能順利進入細胞，發(fā)揮相應的作用，進而研究其細胞功能及相應的影響。廣泛應用于基因功能研究、調控基因表達、癌癥、疾病模型相關研究和重組蛋白研究等生物學試驗。
1.質粒質量：請務必使用高純度無內毒素轉染級質粒。通過260nm光吸收測定DNA濃度，260nm/280nm比值確定DNA純度（比值應該在1.8～2.0的范圍之內）。如有可能，請通過瓊脂糖凝膠電泳檢測質粒的完整性。
2.細胞條件：使用適當保存和經常傳代的健康細胞。確保細胞沒有被細菌、真菌或支原體污染。如果細胞是近期復蘇的液氮凍存細胞，請在轉染前至少傳代兩次。建議使用GIBCO或者李記生物的胎牛血清培養(yǎng)細胞。
3.細胞培養(yǎng)液要求：EZTrans細胞轉染試劑可用于有血清培養(yǎng)基的轉染，并且轉染前不需要換培養(yǎng)基。但是，制備轉染復合物時要求用無血清培養(yǎng)基稀釋DNA和轉染試劑，因為血清會影響復合物的形成。確保細胞培養(yǎng)液沒有被細菌、真菌或支原體污染。轉染時培養(yǎng)液中不添加抗生素。
4.DNA濃度和EZTrans細胞轉染試劑量的優(yōu)化：DNA濃度和轉染試劑使用量受細胞類型及其他實驗條件影響，初次使用應優(yōu)化DNA濃度和轉染試劑量以得到最大的轉染效率。使用者可嘗試每1μgDNA使用1～4μL體積線性PEI轉染試劑進行優(yōu)化。DNA和轉染試劑的比例，通常推薦是1:2~1:5。
更新時間：2023-02-10
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