如何清洗載玻片和蓋玻片

    使用顯微鏡的過(guò)程中，如果載玻片和蓋玻片蒙著一層看不見(jiàn)的油脂、指紋或堿性殘留，觀察結(jié)果都會(huì)大打折扣。很多實(shí)驗(yàn)室新手在第一次嘗試清潔玻片時(shí)，常常會(huì)感到困惑：如何清洗載玻片和蓋玻片才能清除污垢，又不損傷它們光滑的表層？為什么有時(shí)候手洗后的玻片反而在鏡下看到了無(wú)數(shù)細(xì)小的紙屑和劃痕？

    要解決這些困惑，首先需要確立一個(gè)清潔原則：相比常規(guī)玻璃器皿，載玻片與蓋玻片屬于精密光學(xué)耗材。因此，如何清洗載玻片和蓋玻片的答案，不是單純地把它們?nèi)舆M(jìn)洗潔精水里涮涮，而是一套將污漬分類(lèi)、將新舊區(qū)分、將物理與化學(xué)清潔相結(jié)合的規(guī)范操作體系。

如何清洗載玻片和蓋玻片：理清“新"與“舊"的起點(diǎn)差異

    在動(dòng)手清洗前，先明確如何清洗載玻片和蓋玻片的前提條件。新購(gòu)進(jìn)的玻片與實(shí)驗(yàn)回收的舊玻片，上面附著的污物類(lèi)型和性質(zhì)不同。

    新購(gòu)買(mǎi)的載玻片和蓋玻片往往并非我們所想的那么潔凈。生產(chǎn)中為了使表面平整，通常附著了游離的堿性物質(zhì)和微量的金屬離子。

    而做完實(shí)驗(yàn)的舊玻片，面臨的問(wèn)題則更復(fù)雜。殘存的香柏油、石蠟、中性樹(shù)膠、染色液以及各類(lèi)生物樣本殘留，甚至可能攜帶致病菌，絕對(duì)不能與新玻片混合清洗。

    新玻片的標(biāo)準(zhǔn)清潔流程與處理

    掌握了新舊區(qū)別，我們便能從容地執(zhí)行第一步的系統(tǒng)性化學(xué)清洗。

    新玻片的深度酸洗與中和

    針對(duì)新買(mǎi)的載玻片與蓋玻片，首先需進(jìn)行酸洗。將新玻片浸泡在10%-20%的鹽酸溶液中，或者浸泡在2%的鹽酸酒精溶液中幾個(gè)小時(shí)。

    酸洗的原理是利用鹽酸中和玻片表層的游離堿，并去除生產(chǎn)過(guò)程中殘留的金屬離子。接下來(lái)，取出玻片，用大量的自來(lái)水換洗2至3次，直至將酸液與雜質(zhì)沖刷干凈。

    最后一步是用蒸餾水進(jìn)行精細(xì)置換，再?zèng)_洗2至3次，防止自來(lái)水中的礦物質(zhì)干燥后形成白色的水痕。清洗完成的玻片浸泡在95%的酒精中1分鐘，取出后用潔凈的紗布輕輕擦干，或直接放入60℃烘箱中烘干備用。

    清洗合規(guī)標(biāo)準(zhǔn)與儲(chǔ)存

    在如何清洗載玻片和蓋玻片的操作中，不能僅憑肉眼感覺(jué)干不干凈，而應(yīng)有一套判定標(biāo)準(zhǔn)。

    檢定玻璃器皿是否潔凈透亮的一個(gè)基本依據(jù)是：在清洗后，玻片表面應(yīng)不掛水珠，可形成均勻明亮的水膜。如果水膜破裂、聚成珠狀，則表明表面仍殘留有油脂及污垢。

    清洗達(dá)標(biāo)后的玻片，浸泡入95%的酒精中，或者存放進(jìn)干凈、無(wú)塵的玻片盒中備用。

    如何清洗載玻片和蓋玻片：舊玻片的分類(lèi)處理法

    實(shí)驗(yàn)室里的大多數(shù)污染玻片，都屬于舊玻片范疇。處理舊玻片時(shí)，需要根據(jù)玻片變臟的具體情形，采取對(duì)應(yīng)的清潔手段。

    針對(duì)一般水溶性殘留

    如果只是常規(guī)的臨時(shí)裝片，上面的生理鹽水、培養(yǎng)基或普通染料，先用清水沖洗，初步去除大量殘留。接著，對(duì)于有菌斑或輕微油污的玻片，放入2%的來(lái)蘇爾或5%的石碳酸溶液中浸泡，取出后流水沖洗。再放入5%的肥皂水或洗衣粉水中煮沸20至30分鐘，頑固附著的污垢在熱堿的作用下會(huì)軟化分解。

    針對(duì)嚴(yán)重的頑固有機(jī)污漬

    如果載玻片上沾附有中性樹(shù)膠、石蠟、香柏油等有機(jī)物，常規(guī)的肥皂煮沸也很難處理干凈。針對(duì)此類(lèi)頑固物，可以將玻片浸泡在專(zhuān)用的鉻酸洗液中。鉻酸洗液由重鉻酸鉀、清水和濃硫酸配制，具有氧化和去污能力。

    將舊玻片在鉻酸洗液中浸泡過(guò)夜，直至污漬碳化脫落。取出后務(wù)必戴好橡膠手套，用大量流水充分沖洗12小時(shí)以上，直至去除酸液殘留。

    針對(duì)細(xì)小的物理纖維

    除了化學(xué)溶解，小型頑固雜質(zhì)還應(yīng)配合超聲波清洗。超聲波清洗機(jī)的運(yùn)作溫度通常在40℃~60℃效果較佳。清洗劑與高頻振動(dòng)的雙重作用，能從各個(gè)方向擊碎并去除纖維，有效避免手動(dòng)擦拭帶來(lái)的劃痕。

    特殊消毒

    在涉及病原微生物的實(shí)驗(yàn)中，如何清洗載玻片和蓋玻片時(shí)，必須把生物安全放在優(yōu)先的位置。

    檢查過(guò)致病菌的載玻片及蓋玻片，應(yīng)先用2%的來(lái)蘇兒或0.25%的新潔爾滅浸泡，再在121℃、103.4kPa的條件下高壓蒸汽滅菌15至20分鐘。切忌將含有致病菌的玻片未滅菌便直接清洗，以免污染洗滌環(huán)境。

    如何清洗載玻片和蓋玻片：精細(xì)操作與避坑指南

    對(duì)于極薄的蓋玻片和經(jīng)過(guò)特殊處理的防脫載玻片，如何清洗載玻片和蓋玻片的細(xì)節(jié)更有講究。

    蓋玻片的操作禁忌

    蓋玻片極薄，一旦干結(jié)成塊狀很難清洗，所以用過(guò)的蓋玻片要立即浸泡在清水中。在擦拭干燥過(guò)的蓋玻片時(shí)，需用潔凈的紗布同時(shí)輕柔擦拭兩面，動(dòng)作要輕，以免捏碎。

    防脫載玻片的特殊保護(hù)

    處理防脫載玻片時(shí)要尤其小心。這種玻片表面涂布有多聚賴(lài)氨酸或硅烷化處理層，不可擦拭、不可刮劃，更不可用超聲波長(zhǎng)時(shí)間清洗，否則會(huì)破壞粘附層，使其喪失防脫功能。

    溶劑的禁忌

    絕對(duì)不能用含有熒光增白劑的洗衣粉清洗用于熒光分析的玻片。殘留的化學(xué)成分在光源下會(huì)激發(fā)出干擾背景，嚴(yán)重影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

    嚴(yán)禁混洗

    含有石蠟油或凡士林等厚油脂的器皿，要與普通的玻片分開(kāi)清潔?；煜磿?huì)交叉污染，使原本潔凈的玻片表面也沾上油膜。正確的做法是先將厚油脂器皿物理除油，再高溫煮沸進(jìn)行單獨(dú)清潔。

    如何清洗載玻片和蓋玻片：潔凈度驗(yàn)證與收尾

    完成清潔后，面對(duì)一大摞透亮的玻片，需要驗(yàn)證潔凈度。對(duì)著光線(xiàn)觀察，理想的清潔狀態(tài)是水膜均勻鋪開(kāi)，沒(méi)有水珠。如果玻片上有水珠收縮，說(shuō)明殘留有疏水層，需返工重洗。

    最后是儲(chǔ)存環(huán)節(jié)。清洗達(dá)標(biāo)的玻片應(yīng)立即放入95%的酒精中浸泡，既防氧化又能長(zhǎng)久保持潔凈，或者存放在無(wú)塵的玻片盒內(nèi)。存放環(huán)境務(wù)必保持干燥、防止滋生霉菌。

總結(jié)

    如何清洗載玻片和蓋玻片，可以歸納為一套從準(zhǔn)備到收尾的清晰流程：從頭開(kāi)始養(yǎng)成分門(mén)別類(lèi)、預(yù)處理先行的習(xí)慣，新玻片酸洗去堿、舊玻片加熱浸泡去垢。針對(duì)不同類(lèi)型的污漬，有針對(duì)性地選擇化學(xué)洗液或高頻振動(dòng)：一般水溶物用肥皂煮沸，有機(jī)物用二甲苯或鉻酸浸泡。在整個(gè)操作中杜絕二次損傷，拒絕使用帶紙漿的普通衛(wèi)生紙，保護(hù)防脫涂層。精細(xì)處理蓋玻片的易碎性與生物安全高壓滅菌，最終將所有玻片納入規(guī)范的無(wú)塵儲(chǔ)存體系中。

    下一次面對(duì)污漬難以清除的玻片時(shí)，不妨先停下來(lái)，看一看手邊需要清理的具體污垢，判斷一下是否需要更換清潔液或啟動(dòng)滅菌流程。把這個(gè)不起眼的清潔環(huán)節(jié)變成一次細(xì)致的觀察與規(guī)范的動(dòng)手，視野內(nèi)的微觀世界一定會(huì)變得更加真實(shí)和清晰。