轉(zhuǎn)膜儀是干嘛的

    轉(zhuǎn)膜儀在實(shí)驗(yàn)室里的核心任務(wù)，就是把凝膠中已經(jīng)分離好的蛋白質(zhì)，在電場(chǎng)力的作用下轉(zhuǎn)移到一張固相膜上。這個(gè)過(guò)程是WesternBlot實(shí)驗(yàn)里連接“蛋白分離"和“抗體檢測(cè)"這兩個(gè)步驟的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。

    它的存在很有必要，因?yàn)榈鞍踪|(zhì)被“固定"在膜上之后，才能方便地讓抗體接觸到，進(jìn)行后續(xù)的孵育和檢測(cè)。而且像聚丙烯酰胺這樣的凝膠本身很脆弱，不容易操作，而轉(zhuǎn)印膜就結(jié)實(shí)多了，能為后續(xù)的洗滌、封閉等步驟提供一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的平臺(tái)。

轉(zhuǎn)膜儀是怎么工作的？——電場(chǎng)驅(qū)動(dòng)的“分子搬家"

    轉(zhuǎn)膜儀工作時(shí)，其實(shí)是把凝膠和膜緊緊貼合在一起，形成一個(gè)“三明治"結(jié)構(gòu)，然后放在電場(chǎng)里。因?yàn)榈鞍踪|(zhì)在SDS-PAGE中帶上了負(fù)電，它們就會(huì)在電場(chǎng)驅(qū)動(dòng)下，從凝膠（負(fù)極）向膜（正極）移動(dòng)，被“印"在膜上。

    實(shí)驗(yàn)室里常見的轉(zhuǎn)膜儀有哪幾種？

    根據(jù)電場(chǎng)方向和結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)，常用的轉(zhuǎn)膜儀主要分為這三種：

    1.濕式轉(zhuǎn)膜儀（濕轉(zhuǎn)）

    這是比較經(jīng)典的方法。把整個(gè)“三明治"泡在轉(zhuǎn)膜緩沖液里，好處是散熱好，轉(zhuǎn)膜效果穩(wěn)定，適用范圍廣。不過(guò)它通常需要1-2個(gè)小時(shí)甚至更久，尤其適合分子量比較大的蛋白。

    2.半干式轉(zhuǎn)膜儀（半干轉(zhuǎn)）

    這種方法速度快，不需要大量緩沖液。它用浸滿轉(zhuǎn)膜液的厚濾紙作為離子源，直接把“三明治"夾在陰陽(yáng)兩極之間。因?yàn)殡姌O距離近，電場(chǎng)強(qiáng)度高，通常15-30分鐘就能完成轉(zhuǎn)印。更適合中小分子量的蛋白。

    3.快速轉(zhuǎn)印系統(tǒng)

    這是近幾年的新技術(shù)，本質(zhì)上是一種升級(jí)版的半干轉(zhuǎn)。它通過(guò)特殊的硬件和耗材，把轉(zhuǎn)膜時(shí)間縮短到了幾分鐘，效率很高，適合需要高通量快速出結(jié)果的實(shí)驗(yàn)室。

總結(jié)

    簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō)，轉(zhuǎn)膜儀就是WesternBlot實(shí)驗(yàn)里那個(gè)負(fù)責(zé)把蛋白從膠上“搬"到膜上的設(shè)備。濕轉(zhuǎn)效果穩(wěn)定，半干轉(zhuǎn)速度快，快速轉(zhuǎn)印則追求高效。它在蛋白質(zhì)凝膠電泳和免疫檢測(cè)之間架起了一座必要的橋梁。

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