ISEQ00010默克PVDF膜現貨0.22µm

    在蛋白質免疫印跡與蛋白質測序實驗中，小分子量蛋白的信號強度往往容易被忽視，其轉印效率更是決定結果成敗的關鍵。ISEQ00010默克PVDF膜作為MerckMilliporeImmobilon®-PSQ系列的經典產品，采用0.2µm微孔聚偏氟乙烯(PVDF)基質，以高達340µg/cm2的BSA吸附量，為科研人員提供了低背景、高靈敏度的轉印支持。其26.5cmx3.75m的大尺寸卷裝設計便于按需裁剪，專用于小于20kDa蛋白質的低分子量Westernblotting、氨基酸分析以及N端蛋白質測序，有效防止小分子蛋白在轉印過程中的滲漏問題。

    選擇ISEQ00010默克PVDF膜，意味著為您的低分子量蛋白檢測工作選擇了一份經過全球實驗室驗證的高捕獲率轉印載體。

一、產品核心優(yōu)勢解析

    ISEQ00010默克PVDF膜的設計聚焦于低分子量蛋白轉印中的核心挑戰(zhàn)：如何在保持高吸附率的同時防止小分子量蛋白的滲漏，以及如何提高小分子量蛋白在測序中的得率。

    0.2µm精確孔徑與大的內表面面積

    ISEQ00010默克PVDF膜的核心技術參數在于其0.2µm的微孔直徑。相較于0.45µm的標準PVDF膜，0.2µm的孔徑更小、內比表面積更大，能夠有效降低膜滲漏，尤其適合分子量小于20,000的蛋白質的印跡。

    這一特性使其在捕獲低分子量蛋白方面具備明顯優(yōu)勢，即使對于分子量極低的小肽段也能實現高效結合，避免了目標蛋白直接穿透膜體而造成的信號丟失。

    超高蛋白結合能力

    ISEQ00010默克PVDF膜通過靜電和疏水雙重吸附機制，實現了對不同類型蛋白質的穩(wěn)定結合。其技術參數顯示：BSA吸附量高達340µg/cm2，胰島素吸附量達262µg/cm2，山羊IgG吸附量更是達到了448µg/cm2。

    對于胰島素等小分子量蛋白，其結合量甚至達到了較高的數值，這一特性使得該膜在處理裂解物或難水解蛋白時，仍能保持較高的捕獲效率，有效保障低豐度靶標的檢測靈敏度。

    防止?jié)B漏：保護小分子量蛋白的完整性

    在常規(guī)Westernblot實驗中，小于20kDa的蛋白質極易在轉印過程中“穿膜而過"，導致膜上無信號或信號極弱。ISEQ00010默克PVDF膜憑借0.2µm的精密孔徑和大內表面面積，能夠有效阻截這些極易滲透的小分子蛋白，確保其被牢固地捕獲在膜上，為后續(xù)的抗體孵育和檢測提供了堅實基礎。

    實際轉印測試結果表明，采用常規(guī)PVDF膜時會有部分低分子量蛋白透過，而在主膜之后放置一片ISEQ00010默克PVDF膜作為捕獲層，可有效捕捉穿透的小分子蛋白，驗證了其防止?jié)B漏的性能。

    物理性能與化學兼容性

    與傳統(tǒng)的硝酸纖維素膜相比，ISEQ00010默克PVDF膜具有更優(yōu)的物理性能。該膜不易破裂或卷曲，便于裁剪且在切割過程中不會碎裂，非常適合需要精確裁剪和反復操作的復雜實驗流程。

    此外，其具備廣泛的溶劑相容性以及優(yōu)異的著色能力，可以重復檢測（Strippingandreprobing），對于需要優(yōu)化抗體組合或檢測多種靶蛋白的復雜實驗方案尤為重要。

二、核心參數與規(guī)格

    ISEQ00010默克PVDF膜的主要技術參數如下：

    參數類別具體規(guī)格

    產品貨號ISEQ00010

    品牌系列MerckMilliporeImmobilon®-PSQ

    濾膜材質疏水性聚偏氟乙烯（PVDF）

    孔徑0.2µm

    尺寸26.5cm×3.75m（卷裝）

    濾膜顏色白色，光面

    可潤濕性疏水

    BSA吸附量340µg/cm2

    胰島素吸附量262µg/cm2

    山羊IgG吸附量448µg/cm2

    主要吸附機制靜電、疏水

    應用范圍低分子量Westernblotting、氨基酸分析、N端蛋白質測序、Dot/Slotblotting

    檢測方法化學發(fā)光法、放射檢測法、顯色法、熒光法

    兼容染色劑考馬斯亮藍、麗春紅、印度墨水、酰胺黑、膠體金、Sypro®ruby等

    儲存條件室溫干燥避光保存

三、適用場景與用戶價值

    ISEQ00010默克PVDF膜適用于多個分子檢測領域，尤其在小分子量蛋白研究中展現出核心價值。

    低分子量Westernblotting（<20kDa）

    ISEQ00010默克PVDF膜專為低分子量蛋白質的印跡檢測而設計。在神經科學、細胞因子研究、小分子肽段檢測等場景中，傳統(tǒng)0.45µm膜常常因為孔徑過大導致小分子量蛋白穿膜而過，而ISEQ00010默克PVDF膜憑借0.2µm的精確孔徑和大內表面面積，能夠有效防止此類滲漏現象，確保低豐度的小分子靶標被充分捕獲，提高檢測靈敏度。

    對于分子量小于20,000的蛋白質，尤其是胰島素、組蛋白、細胞因子及小分子量裂解物或難水解蛋白，ISEQ00010默克PVDF膜是印跡實驗的理想選擇，可獲得更高的測序得率。

    N端蛋白質測序與氨基酸分析

    由于ISEQ00010默克PVDF膜具有較高的蛋白質吸附率和測序得率，0.2µm孔徑與大的內表面面積相結合，使其特別適用于Edman降解法N端測序。在該應用中，目標蛋白需要被牢固吸附在膜表面以耐受多輪化學反應，ISEQ00010默克PVDF膜的穩(wěn)定結合特性能夠有效滿足這一要求。

    免疫檢測與蛋白點結合

    ISEQ00010默克PVDF膜適用于WesternBlotting、Immunoblotting和Dot/SlotBlotting。其疏水性膜體在經甲醇活化后，能夠通過疏水作用牢固吸附蛋白，背景低、著色容易，結果清晰。

    大規(guī)模轉印與高通量實驗

    ISEQ00010默克PVDF膜采用26.5cm×3.75m卷裝設計，可同時處理多塊凝膠，適配高通量Westernblot實驗。卷裝可按需裁剪，支持多組平行實驗，適合科研機構的批量研究以及高校分子生物學教學實驗。此外，Merck還提供采用按規(guī)格裁切的印跡方片膜和兩層過濾紙組成的印跡三明治，方便用戶根據實驗規(guī)模靈活選用。

四、使用操作指南

    為了充分發(fā)揮ISEQ00010默克PVDF膜的性能，以下操作建議可供參考。

    甲醇預處理（膜活化）

    ISEQ00010默克PVDF膜具有疏水性，在直接接觸水相緩沖液前，必須用甲醇進行預處理以活化膜表面。操作步驟：將膜裁剪至所需尺寸，放入100%甲醇中浸泡15-30秒，直至膜體由不透明變?yōu)榘胪该鳡睿粚⒛と〕?，轉移至轉移緩沖液中平衡5-10分鐘，即可用于轉印。

    小分子量蛋白轉印優(yōu)化

    為增強低分子量蛋白質（<20kDa）的結合效率，可在陽極緩沖液中加入20-30%的甲醇，并減小施加的電流。過高的電壓會導致小蛋白快速穿膜，采用濕轉方式并適當延長轉印時間，有助于小分子蛋白被充分捕獲。

    高分子量蛋白轉印建議

    對于高分子量蛋白質，可以延長轉移時間，并在轉移緩沖液中加入低濃度的十二烷基Na2SO3（<0.01%w/v）以改善洗脫效率，確保大分子量蛋白從凝膠中充分轉移至膜上。

    干燥保存與再水化

    如果蛋白質轉移至ISEQ00010默克PVDF膜后不立即染色操作，可以干燥保存而不會影響試驗。具體操作：將膜放在濾紙上，在室溫下干燥1-2小時，然后用保鮮膜覆蓋，并保存在陰涼、黑暗的地方。

    在繼續(xù)染色/脫色和測序之前，可以使用以下方法之一重新濕膜：（1）將膜置于100%甲醇中，用水洗滌，然后在用于染色的溶劑中平衡；（2）直接將膜放入至少含有50%甲醇的染色液中。

五、操作注意事項

    操作時請佩戴手套，避免手上蛋白污染膜面

    使用干凈平頭鑷子夾取ISEQ00010默克PVDF膜，防止劃傷或折痕

    該膜支持多次重復檢測，可在完成一次免疫檢測后，通過Strip緩沖液去除抗體后再次雜交

    常見問題與解決建議

    在ISEQ00010默克PVDF膜的使用過程中，如遇以下問題可參考對應建議：

    常見問題可能原因解決建議

    背景過高封閉不充分或抗體濃度過高延長封閉時間（室溫1-2小時或4℃過夜），優(yōu)化一抗/二抗稀釋比例

    小分子蛋白信號弱轉印條件不當或小蛋白穿膜在陽極緩沖液中加入20-30%甲醇，減小電流，適當延長轉印時間

    大分子蛋白轉印轉膜時間不足或SDS含量偏低增加電壓或轉膜時間，在轉膜緩沖液中加入0.01-0.04%SDS

    膜無法浸潤緩沖液甲醇活化不充分確保在100%甲醇中浸泡至膜體半透明后再進行緩沖液平衡

    膜面出現氣泡操作過程中混入空氣操作前用緩沖液充分浸潤，轉印時用滾輪排除氣泡

六、選型參考與采購信息

    在選擇ISEQ00010默克PVDF膜時，可參考以下因素：

    決策維度推薦選擇核心考量

    目標蛋白大小分子量<20kDa蛋白→ISEQ00010（0.2µm）；>20kDa蛋白→IPVH00010（0.45µm）根據目標分子量選擇合適孔徑，避免小蛋白穿膜

    應用類型低分子量WB、N端測序、氨基酸分析→ISEQ00010該膜專為小蛋白和測序場景優(yōu)化

    通量需求高通量、批量實驗→26.5cm×3.75m卷裝可按需裁剪，適應多種凝膠尺寸

    檢測方法化學發(fā)光、顯色、熒光、放射性檢測→兼容檢測方式靈活，適配范圍廣

    重復使用需求需要膜再生（stripandreprobe）→PVDF膜PVDF膜支持剝離抗體后重復雜交檢測

總結

    綜上所述，ISEQ00010默克PVDF膜以其0.2µm精準孔徑、高達340µg/cm2的BSA結合力以及26.5cm×3.75m的大尺寸卷裝設計，成為低分子量Westernblot、N端蛋白質測序和氨基酸分析等分子檢測實驗中的可靠載體。無論是小分子量蛋白的精準捕獲，還是需要高蛋白吸附率的蛋白質測序應用，這款產品都能為您的印跡檢測工作提供穩(wěn)定高效的轉印支持。根據您的樣品類型和檢測方法選擇合適的孔徑與規(guī)格，并遵循規(guī)范的預處理和轉印流程，將有助于獲得清晰、低背景的印跡結果。

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