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技術(shù)文章
2020-119
牛胚氣管細(xì)胞培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。2）培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。細(xì)胞處理：1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在...
查看更多2020-116
1、收到人肺大靜脈平滑肌細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們。2、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。3、用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落，將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜，隔天再取出觀察。此時多數(shù)細(xì)胞均會貼壁，若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍(lán)染色測定細(xì)胞活力，如果證實(shí)細(xì)胞活力正常，請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染...
查看更多2020-115
活性炭胎牛血清質(zhì)量非常好，用途比較廣，適用于各種癌細(xì)胞株，嬌貴細(xì)胞，原代細(xì)胞，干細(xì)胞（胚胎干細(xì)胞，間充質(zhì)干細(xì)胞等）培養(yǎng)。注意事項(xiàng)：有少量蛋白質(zhì)結(jié)塊析出不影響使用。未融化或融化未經(jīng)搖勻的血清禁止直接放入高溫水浴內(nèi)加溫。減少血清重復(fù)凍融。血清在室溫或4℃冰箱內(nèi)放置過久會影響促細(xì)胞生長效果?；钚蕴刻ヅＱ宀勺孕挛魈m源健康母牛的出生前胎牛，經(jīng)無菌采集、批量混合，經(jīng)過3次0．1um過濾分裝。在此基礎(chǔ)上，經(jīng)過活性炭和葡聚糖處理，以降低血清中多種激素和生長因子水平。活性炭/葡聚糖FBS已經(jīng)...
查看更多2020-19
1、牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量大的天然培養(yǎng)基，含有豐富的細(xì)胞生長必須的營養(yǎng)成份，常用于動物細(xì)胞的體外培養(yǎng)，具有極為重要的功能。2、起酸堿度緩沖液作用。3、牛血清是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。4、有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合，起到解毒作用。5、提供蛋白酶抑制劑，使在細(xì)胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活，保護(hù)細(xì)胞不受傷害。6、提供對維持細(xì)胞指數(shù)生長的激素，基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物，以及主要的低分子營養(yǎng)物。7、提供結(jié)合蛋白，能識別維生素、脂類、金屬和其他...
查看更多2020-19
⒈用于做Western或ELISA的一抗可否用于流式細(xì)胞術(shù)？看你說明書上是怎么說的了，如果沒有說就不可以做流式，需要另外買了。⒉請問流式細(xì)胞術(shù)單抗直接熒光需要幾種對照？首先確認(rèn)你用的直標(biāo)抗體的熒光染料是什么，再確定該抗體的來源種屬，選擇相應(yīng)的同型對照。如：你現(xiàn)在想檢測小鼠淋巴細(xì)胞表面的CD4抗原，熒光染料為FITC，抗體來源為大鼠的IgG1亞型，即RatantiMouseCD4-FITC（IgG1），你所需要的同型對照就應(yīng)該是RatIgG1-FITC，一般的抗體說明上都會寫清...
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